返回主站|会员中心|保存桌面|手机浏览
普通会员

上海必优生物科技有限公司

德国拜发(R-Biopharm)试剂盒

新闻中心
  • 暂无新闻
产品分类
  • 暂无分类
站内搜索
 
友情链接
  • 暂无链接
首页 > 供应产品 > [禽病检测]禽白血病J亚型抗体检测 ALV
[禽病检测]禽白血病J亚型抗体检测 ALV
点击图片查看原图
产品: 浏览次数:817[禽病检测]禽白血病J亚型抗体检测 ALV 
品牌: Synbiotics
产品型号: 96-6545
产品规格: 480
单价: 面议
最小起订量:
供货总量:
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2017-01-22 09:42
  询价
详细信息

使用说明

禽白血病-J亚型抗体检测试剂盒

Avian Leukosis Virus Subgroup J Antibody Test Kit (ALV-J)

Synbiotics辛百克斯(96-6545)

用途    

禽白血病J亚型抗体检测试剂盒用于快速检测鸡血清或蛋黄中ALV-J抗体。

试剂盒成份和数量

a) 包被抗P27抗体的酶标板                       5块

b) AE阳性血清对照(+)                          0.2ml(直接使用)

c) 阴性血清对照 (-)                           0.2ml(直接使用)

d) 洗涤液                                        200ml(用前1:20稀释)

e) 羊抗鸡酶标二抗IgG酶标记物                    1.7ml(用前1:50稀释)

f) 终止液                                        25ml(用前1:5稀释)

g) 样品稀释液                                    200ml(直接使用)

h) 氢化ABTS 底物溶液                             100ml(直接使用)

需自备器材

准确的移液器、量筒、试管、96孔稀释板、双蒸水或去离子、酶标仪、洗板机

样品和试剂稀释步骤(一块96孔酶标板的使用量)

A、 血清 用样品稀释液作两次1:10(10ul血清+90ul样品)稀释,最终稀释100倍;

B、 阳性血清对照 在离心管里加500ul样品稀释液,再加5ul阳性对照充分混匀;

C、 阴性血清对照 在离心管里加500ul样品稀释液,再加5ul阴性对照充分混匀;

D、 洗涤液 用20ml洗涤液加380ml蒸馏水或去离子水,混匀;

E、 酶标记物 100ul酶标记物加10ml样品稀释液,混匀;

F、 终止液 2.5ml终止液加10ml实验室级水混匀(注意:5倍终止液冷藏保存时可能会产生白色固体,这并不影响产品质量。可以在室温或37℃下溶解后使用)。

ELISA检测步骤

a)     事先画好表格并标记待检样品和阴、阳性对照的位置,取出一块酶标板,相应做好标记;

b)     将稀释好的阳性对照加入A1、A3和H11孔,100ul/孔;

c)     将稀释好的阴性对照加入A2、H10和H12孔,100ul/孔;

d)     将稀释好的待检样品加入到相应孔内,100ul/孔;

e)     室温孵育30分钟。

f)     每孔加入300ul稀释好的洗涤液,允许浸泡3分钟,倒出洗液,在吸水纸上拍板,确保无残留。再重复以上步骤2-3遍。

g)     加入稀释好的酶标记物,100ul/孔;

h)     室温孵育30分钟;

i)     同f洗涤;

j)     加入底物,100ul/孔 (注意:底物本来无色,如变色则不能使用) ;

k)     室温孵育15分钟;

l)     加入稀释好的终止液,100ul/孔;

m)     用酶标仪在405-410nm波长下读板(读板前确保每孔无气泡)。

结果

实验的有效性:

只有当阴性对照算术平均值小于0.200,阳性对照矫正值在0.250-0.9之间,测定结果才有效;如果二者中任何一个不在范围内,则测定结果无效,需重新检测。如果待检样品的SP值小于或等于0.399,则视其抗体滴度为0,或者没有ALV-J抗体的反应。

最佳值的范围:阴性对照在0.05-0.095,阳性对照值在0.4-1.00,才能确保实验结果的一致性。请注意如果检测结果不在以上最佳范围内,不等同于检测结果无效。

 

结果的计算:

a)     阳性平均值(PCX):PCX=(A1+A3+H11)/3

b)     阴性平均值(NCX):NCX=(A2+H10+H12)/3

c)     S/P值:S/P=(样品OD值-NCX)/(PCX-NCX)

d)     抗体滴度的换算关系:  Log10滴度=(1.224×log10SP)+3.860

 

结果分析:

SP临界值:辛百克斯每种ELISA检测试剂盒都有一个与阳性血清对照对应的SP临界值,用这个SP临界值可以很清楚地去区分阳性样品与阴性样品,ALV-J ELISA检测试剂盒的SP临界值如下:

                          SP 临界值               效价范围

≤0.399                   0

>0.399                ≥2360

ALV-J亚型抗体滴度为0,说明该样品中本试剂盒的阴阳性对照来说没有明显的ALV-J亚型特异性抗体;待检血清中出现ALV-J亚型抗体滴度大于0的样品,说明该样品相对ALV-J亚型ELISA试剂盒的阴阳性对照来说有明显的ALV-J抗体。然而,我们不知道该ALV-J亚型抗体水平对鸡群是否有保护性,也分辨不出该ALV-J亚型抗体是由疫苗免疫产生的还是野毒感染所致。理想的ALV-J亚型的疫苗免疫程序和什么样的抗体水平对鸡群有保护,是由实验人员通过比较疫苗免疫前后ALV-J亚型抗体水平和鸡群的临床表现来判定的。

 

注意事项

好的实验结果必须遵守实验操作规则,使用好的安全实验技术;所有试剂和样品都要视为生物安全材料处理;试剂盒中的试剂如果已经过期,不要使用;使用过的洗液,对照血清,检测板,检测样品和其它检测试剂必须用漂白剂或强氧化剂作无害化处理;所有试剂不要被血清和细菌污染;每块酶标板都有湿度显示,如果显示出粉红色,板则需清理(漂白剂清洗)或无害化处理;谨防试剂溅入眼睛和皮肤,一旦溅入,立即用凉水冲洗干净;不要用嘴对着吸管吸取试剂瓶内的试剂。

试剂盒内所有组份需在2~7℃保存;在开始实验前,所有的检测试剂必须回温至室温(21℃-24℃)!最佳实验温度:70-75℉,即21-24℃。室温高可能导致OD值偏高。

客户服务电话:010-84840640

北京市昌平区立汤路186甲龙德紫金3座1222室

 
-

询价单