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上海必优生物科技有限公司

德国拜发(R-Biopharm)试剂盒

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首页 > 供应产品 > [禽病检测]传染性喉气管炎抗体检测 LT
[禽病检测]传染性喉气管炎抗体检测 LT
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产品: 浏览次数:718[禽病检测]传染性喉气管炎抗体检测 LT 
品牌: Synbiotics
产品型号: 96-6521
产品规格: 960
单价: 面议
最小起订量:
供货总量:
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2017-01-22 09:42
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详细信息

使用说明

鸡喉气管炎病毒抗体检测试剂盒

Fowl Laryngotracheitis Virus Antibody Test Kit(FLT)

Synbiotics辛百克斯(96-6521

用途

鸡喉气管炎病毒(FLTV)抗体检测试剂盒用于快速检测鸡血清或蛋黄中ILT抗体。

试剂盒成份和数量

a)包被ILTV抗原的酶标板                          10块

b) ILT阳性血清对照(+)                          0.2ml(用前1:100稀释)

c) 阴性血清对照 (-)                           0.2ml(用前1:100稀释)

d) 洗涤液                                        200ml(用前1:20稀释)

e) 羊抗鸡酶标二抗IgG酶标记物                    1.7ml(用前1:100稀释)

f) 终止液                                        25ml(用前1:5稀释)

g) 样品稀释液                                    2*200ml(直接使用)

h) 氢化ABTS 底物溶液                             100ml(直接使用)

需自备器材

准确的移液器、量筒、试管、96孔稀释板、双蒸水或去离子、酶标仪、洗板机

样品和试剂稀释步骤(一块96孔酶标板的使用量)

A、 血清 用样品稀释液作两次1:10(10ul血清+90ul样品)稀释,最终稀释100倍;

B、 阳性血清对照 在离心管里加500ul样品稀释液,再加5ul阳性对照充分混匀;

C、 阴性血清对照 在离心管里加500ul样品稀释液,再加5ul阴性对照充分混匀;

D、 洗涤液 用20ml洗涤液加380ml蒸馏水或去离子水,混匀;

E、 酶标记物 100ul酶标记物加10ml样品稀释液,混匀;

F、 终止液 2.5ml终止液加10ml实验室级水混匀(注意:5倍终止液冷藏保存时可能会产生白色固体,这并不影响产品质量。可以在室温或37℃下溶解后使用)。

ELISA检测步骤

a)     事先画好表格并标记待检样品和阴、阳性对照的位置,取出一块酶标板,相应做好标记;

b)     将稀释好的阳性对照加入A1、A3和H11孔,100ul/孔;

c)     将稀释好的阴性对照加入A2、H10和H12孔,100ul/孔;

d)     将稀释好的待检样品加入到相应孔内,100ul/孔;

e)     室温孵育30分钟。

f)     每孔加入300ul稀释好的洗涤液,允许浸泡3分钟,倒出洗液,在吸水纸上拍板,确保无残留。再重复以上步骤2-3遍。

g)     加入稀释好的酶标记物,100ul/孔;

h)     室温孵育30分钟;

i)     同f洗涤;

j)     加入底物,100ul/孔 (注意:底物本来无色,如变色则不能使用) ;

k)     室温孵育15分钟;

l)     加入稀释好的终止液,100ul/孔;

m)     用酶标仪在405-410nm波长下读板(读板前确保每孔无气泡)。

结果

实验的有效性:

只有当阴性对照算术平均值小于0.200,阳性对照矫正值在0.250-0.900之间,测定结果才有效;如果二者中任何一个不在范围内,则测定结果无效,需重新检测。如果待检样品的SP值小于或等于0.150,则视其抗体滴度为0,或ILT抗体阴性。

最佳值的范围:阴性对照在0.060-0.080,阳性对照值在0.400-0.750,才能确保实验结果的一致性。请注意如果检测结果不在以上最佳范围内,不等同于检测结果无效。

 

结果的计算:

a)     阳性平均值(PCX):PCX=(A1+A3+H11)/3

b)     阴性平均值(NCX):NCX=(A2+H10+H12)/3

c)     S/P值:S/P=(样品OD值-NCX)/(PCX-NCX)

d)     抗体滴度的换算关系:  Log10滴度=(1.464×log10SP)+3.740

 

结果分析:

SP临界值:辛百克斯每种ELISA检测试剂盒都有一个与阳性血清对照对应的SP临界值,用这个SP临界值可以很清楚地去区分阳性样品与阴性样品,ILT-ELISA检测试剂盒的SP临界值如下:

                          SP 临界值               效价范围

≤0.150                   0

≥0.151               ≥345

ILT抗体滴度为0,说明该样品中本试剂盒的阴阳性对照来说没有明显的ILT特异性抗体;待检血清中出现ILT抗体滴度大于0的样品,说明该样品相对ILT-ELISA试剂盒的阴阳性对照来说有明显的ILT抗体。然而,我们不知道该ILT抗体水平对鸡群是否有保护性,也分辨不出该ILT抗体是由疫苗免疫产生的还是野毒感染所致。

理想的ILT的疫苗免疫程序和什么样的抗体水平对鸡群有保护,是由实验人员通过比较疫苗免疫前后ILT抗体水平和鸡群的临床表现来判定的。

 

注意事项

好的实验结果必须遵守实验操作规则,使用好的安全实验技术;所有试剂和样品都要视为生物安全材料处理;试剂盒中的试剂如果已经过期,不要使用;使用过的洗液,对照血清,检测板,检测样品和其它检测试剂必须用漂白剂或强氧化剂作无害化处理;所有试剂不要被血清和细菌污染;每块酶标板都有湿度显示,如果显示出粉红色,板则需清理(漂白剂清洗)或无害化处理;谨防试剂溅到眼睛和皮肤,一旦溅到,立即用凉水冲洗干净;不要用嘴对着吸管吸取试剂瓶内的试剂。

试剂盒内所有组份需在2-7℃保存;在开始实验前,所有的检测试剂必须回温至室温(21℃-24℃)!最佳实验温度:70-75℉,即21-24℃。室温高可能导致OD值偏高。

客户服务电话:010-84840640

北京市昌平区立汤路186甲龙德紫金3座1222室

 

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